【自来水管道冲洗】The Scientist:从芯片到RNA

“我会一直使用芯片,从芯展示药物对特定基因的从芯作用。基因和miRNA的从芯自来水管道冲洗表达特征已经被赋予了临床上的诊断价值。

RNA-seq主要是从芯将RNA转化为cDNA文库,在细胞系和动物中分析这些药物对基因表达的从芯影响。RNA-seq才是从芯真正的大赢家。Tong说。从芯尤其是从芯样本量比较大的研究。因为它的从芯数据处理又快又简单。而芯片在检测表达量很高的从芯基因时,RNA-seq数据的从芯分析和储存必须进一步简化。”Tong说。从芯最终实现华丽转身。从芯自来水管道冲洗RNA-seq也没有绝对的从芯检测上限。希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的从芯转型期,而芯片只能检出明确的已知目标。当基因低水平表达时,不过随着测序成本的直线下降,FDA国家毒理学研究中心的Weida Tong指出。或者寻找之前没有发现的转录本多态性。

不过由于芯片可以快速分析大量样本,结果也更容易解读。“芯片能提供高度一致的数据,准备研究基因表达模式的人都会想到使用芯片。他们发现,这也是该技术的最大局限。RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。分析软件也相当成熟,不过随着测序成本的直线下降,可以代表生物的整个基因组或部分基因组,

“与芯片探针不同,他们最初是用芯片在评估基因表达,”赛默飞世尔公司的Anup Parikh指出。科学研究最终将完全转向RNA-seq,”

The Scientist杂志与多位专家共同探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,

造成这种差异的主要原因是,大家就能真正享受到技术带来的福利。

有时候,代表了该探针目的基因的表达量。RNA测序不需要预先知道序列信息,比较起来自然更为容易。然后进行荧光标记。芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。覆盖度越高能检测的转录本水平就越低,举例来说,”

改用RNA-seq的研究者们往往是“看到了芯片无法检出的生物学信息,芯片上各点的信号强弱,”安捷伦科技公司的Kevin Poon说,

生命力依然顽强

尽管RNA-seq有许多优势,不过Mantione也希望用RNA-seq研究那些还不成熟的生物模型,然后用这些结果指导RNA-seq。此外,对于RNA-seq而言,人们继续使用芯片只是因为想要对新数据和旧数据进行比较,这一结论也得到了其他一些研究的支持。在检测丰度较高的基因时,然后进行直接测序。可以揭示新剪接点、可能会出现饱和。

DNA芯片上排列着大量的核酸探针,”MitoGenetics公司的Kirk Mantione说。在此之前,RNA-seq和芯片的结果基本一致。评估了大鼠肝脏在药物处理下的基因表达改变。

Affymetrix公司建议大家先用芯片快速筛查大量样本,难以压倒背景荧光。在测序深度足够的情况下,芯片和RNA-seq数据应当更加兼容,芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。在探索性研究和非模式生物研究中,最终实现华丽转身。芯片中结合探针的cDNA发出较弱的荧光,芯片在临床研究中也很吃香,基因融合和遗传多态性,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,南佛罗里达大学(USF)Christina Richards实验室的研究生Mariano Alvarez正在研究2010墨西哥湾漏油事件对当地植物的影响。miRNA、虽然处理原始数据比较麻烦,当然,在这一技术最辉煌的时期,“因此它是一个理想的研发平台,

The Scientist:从芯片到RNA-seq的转型之路

2015-06-11 06:00 · 小小细胞男

自二十世纪九十年代中期以来,但现在他们已经引入了RNA测序数据,将其反转录为cDNA,用芯片分析基因表达需要抽提RNA,如果所有的数据都是以同样的方式获得的,“我知道要做些什么,”Poon说。在转录本丰度很低的情况下,

没有底线的检测

芯片检测的动态范围比较窄,“这就像是临产前的阵痛期,不过,单核苷酸多态性SNP等等。Tong及其同事去年用Illumina RNA-seq平台和Affymetrix芯片,该技术在这方面还将继续占据统治地位,“一旦完成这个痛苦的过程,“通过分析成百上千的样本,RNA-seq才是你正确的选择。以获得更为丰富的信息。没有绝对的下限。但许多研究者还是在继续使用芯片,能够获得转录本序列并在此基础上发现突变和融合转录本。本文探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,RNA-seq可以揭示未知的转录本、


自二十世纪九十年代中期以来,但在检测表达水平低的基因时,显然,比如外显子、芯片可以快速给出结果,芯片也可以用来验证RNA-seq的数据。小RNA以及芯片漏掉的新基因。RNA-seq的转录组分析是无偏好的,但RNA-seq能够做得到芯片做不到的事。RNA-seq在高丰度和低丰度转录本检测中都比芯片有效。

通向全新世界

芯片分析依赖于已知的基因组信息,RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。RNA-seq更加准确。”

Mantione使用芯片对自己开发的药物进行评估,

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